Penelitian

Efikasi dan Aplikasi Efikasi dan Aplikasi Conditioned Medium Sel Punca Mesenkim Pada Infeksi Rat Coronavirus Sebagai Model Infeksi CoVID19 Secara In Vitro, In Vivo

WAHYU WIDOWATI; TERESA LILIANA WARGASETIA; DIANA KRISANTI JASAPUTRA; ITA MARGARETHA NAINGGOLAN; ERMI GIRSANG; MAWAR SUBANGKIT; IKA ADHANI SHOLIHAH
Publish : 2020 | -


Penelitian dilakukan selama 2 tahun (2 tahap). Penelitian tahun I meliputi : 1.1). Isolasi WJMSCs, 1.2). Karakterisasi WJMSCs (CD90, CD105, CD73, CD34, CD116 , CD19, CD45, HLA-DR, CD44), 1.3.) Diferensiasi WJMSCs (osteosit, adiposit, kondrosit), 1.4). Karakterisasi CM-WJMSCs (IL-1ra, KGF, PGE2), 1.6). Uji in vitro sel IL2 (lung rat) diinduksi rat coronavirus ditambah WJMSCs metode transwell (3 konsentrasi WJMSCs), 1.7). Uji in vitro sel IL2 (lung rat) diinduksi rat coronavirus ditambah CM-WJMSCs (konsentrasi 15%, 30%, 45%), 1.8). Pengukuran marker inflamasi (IL-1β, TNFα, IFNγ, CINC-2, LIX, MCP-1) metode ELISA; 1.9). Migrasi sel; 1.10). Pengukuran apoptosis, nekrosis, death cell metode flowcytometry; 1.11). Kebocoran AFC, APP; 1.12). Pengukuran ekspresi gen NFkB, NLRP3, ASC, dan CASP1,ACE2 metode qRTPCR; 1.13). Perhitungna % jumlah sel terinfeksi; 1.14). Pengukuran hemagglutination inhibitory assay, esterase activity; 1.14). Karakterisasi stem-cell pasca infeksi (apoptosis, nekrosis, death); 1.15). Ekspresi gen perbaikan ( IL-1ra, KGF, PGE2), antivirus (LL-37 dan IDO), reseptor AT2R. Penelitian tahun ke II meliputi : 2.1.). Tikus diinduksi rat coronavirus di beri WJMSCs (1x106, 1x107, 1x108), 2.2). Tikus diinduksi rat coronavirus di beri CM-WJMSCs ( 1 ml CM dari 1x106, 1x107, 1x108), 2.3). Persen survival; 2.4). Marker inflamasi (IL-1β, TNFα, IFNγ, CINC-2, LIX, MCP-1) metode ELISA; 2.5). CD4, CD8, surfactant protein A-D, CFTR metode ELISA; 2.6). Histopatologi organ paru (HE, Masson Trichome); 2.7). IFA (jumlah sel terinfeksi, jenis sel terinfeksi, direct contact WJMSCs); 2.8). IHC organ paru (ACE2, IL6, CD4+, CD8+, makrofag M1, M2); 2.9). Histopatologi patu-paru (HE, Masson Trichome), 2.10). Ekspresi gen ACE2, DC-SIGN,L-SIGN metode qRTPCR; 2.11). Cytokine array.

Visit Original